Resumo
Objetivo: Há muito tempo moscas que posam no rosto tem sido associadas à transmissão da Chlamydia trachomatis, agente causador do tracoma, porém isso nunca foi provado. Para isso nós analisamos quatro critérios, propostos por Barnett, previamente utilizados para incriminar outros artrópodes suspeitos de transmitir a doença. Um desses critérios, a demonstração repetitiva da presença de C. Trachomatis em moscas, ainda não foi alcançado. Nós utilizamos a reação em cadeia da polimerase (PCR) para observar a presença de DNA da C. Trachomatis em moscas da Zona de Gurage na Etiópia.

Métodos: Utilizando papel colante, uma mosca foi coletada da face de cada uma de 103 crianças com idades entre 1 e 10 anos. O pedaço do papel colante em que a mosca foi capturada foi recortado, seguido por coleta de uma área limpa arbitrária do papel colante, que serviu como controle. Kits de PCR Roche Amplicor foram utilizados para detectar o DNA da C. Trachomatis.

Resultados: Nós achamos evidência de C. Trachomatis através de PCR em 15 das 103 moscas versus 0 de 103 controles (p=0,0001).

Conclusão: Esses resultados concordam com o critério final necessário para incriminar moscas como vetores do tracoma. Contudo, estudos intervencionistas serão necessários para demonstrar a importância do controle da mosca.

Resumo
Objetivo: Determinar o gene causador dos defeitos relacionados à doença em dois pacientes com distrofia corneal de Meesmann.

Métodos: Análises mutacionais dos domínios 1A e 2B dos genes queratina 3 (K3) e queratina 12 (K12) de dois pacientes com distrofia corneal de Meesmann foram realizadas através de PCR e sequenciamento direto.

Resultados: Novas mutações no gene K12 foram identificados em ambos os pacientes. Em um paciente um ponto heterozigoto de mutação (429A?C = Arg135Ser) foi encontrado no domínio 1A do gene K12. Essa mutação foi confirmada por restrição enzimática. No segundo paciente uma duplicação do heterozigoto 27-bp foi encontrada inserida no domínio 2B na posição 1222 (1222ins27) do nucleotídeo do gene K12. Essa mutação foi confirmada por eletrólise com gel. As mutações não estavam presentes em controles não acometidos.

Conclusão: Novas mutações no K12 estavam ligadas à distrofia corneal de Meesmann em dois pacientes diferentes. Uma mutação efetiva reposicionando um resíduo da arginina altamente conservada no início da estrutura da sequência da hélice foi encontrada em um paciente e uma inserção mutante, consistindo em duplicação dos 27 nucleotídeos foi encontrada previamente à terminação da dupla hélice nesta ordem.
 

Resumo
Objetivos: No presente estudo estudamos os níveis de marcadores de óxido nítrico (ON) no plasma e no humor aquoso de pacientes com glaucoma primário de ângulo aberto (GPAA) e sua relação com a pressão de perfusão ocular.

Métodos: Guanosina monofosfato cíclico (GMPc ) e nitrito (NO2-) foram determinados no plasma e humor aquoso de 38 pacientes com GPA e 46 controles. A pressão arterial sistêmica e pressão intraocular foram medidas para calcular a pressão de perfusão ocular (PPO).

Resultados: Os níveis plasmáticos de GMPc e NO2- foram significativamente menores nos pacientes com glaucoma quando comparados ao grupo controle (p=0,001 e p=0,004). No humor aquoso de pacientes com GPAA as concentrações de GMPc e NO2- também foram menores do que os olhos normais (p=0,0001 e p=0,001, respectivamente). Houve uma associação linear entre o GMPc plasmático e do humor aquoso nos pacientes do grupo de GPAA e controle (r= 0,514, p= 0,029 and r= 0,558, p= 0,004) e esta relação diferiu entre os dois grupos (p=0,003). Considerando os pacientes com glaucoma e os controles, uma correlação positiva foi encontrada entre o GMPc e a PPO (r=0,379, p=0,01) e entre o NO2- e a PPO (r= 0,339, p= 0,040). A correlação GMPc / PPO apresentou significância estatística limítrofe (p=0,05), porém não apresentou significância estatística no GPAA, assim como na associação de NO2- e PPO quando os grupos de estudo foram avaliados separadamente.

Conclusão: Encontramos alterações nos marcadores de ON no plasma e humor aquoso de pacientes com glaucoma. Equilíbrio de ON acometido de forma primária ou secundária pode alterar a pressão de perfusão ocular.

Resumo
Objetivos: Estudar as características da cabeça do nervo óptico (CNO) em um estudo transversal com tomografia confocal de escaneamento por laser, utilizando o tomógrafo Heidelberg (HRT 1) e, desta forma, obter um novo banco de dados HRT para comparação de olhos saudáveis e glaucomatosos.

Métodos: Adultos caucasianos sem história pregressa de moléstia ocular foram incluídos no estudo. O exame ocular avaliou: acuidade visual, biomicroscopia anterior e posterior, perimetria computadorizada e tomografia da cabeça do nervo óptico com HRT. Olhos com doenças oculares foram excluídos. A média, desvio-padrão (+) e diferença entre olhos direito e esquerdo (OD – OE) foram calculados para as medidas HRT 1. Diferenças entre os parâmetros topográficos médios dos participantes masculinos e femininos e entre os quartis etários foram analisadas. Incluímos 1764 olhos de 882 adultos saudáveis (154 mulheres, 728 homens, idade: 46.8±8,6 anos). A população estudada é maior e mais velha do que outros estudos que utilizaram a tomografia confocal de escaneamento por laser.

Resultados: Com o HRT 1 foi observada uma área média do disco óptico de 1,82±0,39 mm2  e uma escavação média de 0,44±0,32 mm2. A relação média de escavação/disco óptico foi de 0,22±0,13. Olhos direitos apresentaram maior RNFLT (0,263±0,066mm) comparado com olhos esquerdos (0,252±0,065mm, p<0,001). Valores maiores em voluntários mais jovens (média 35,7 anos) comparados com participantes mais idosos (média 59,1 anos) foram observados para a área do disco óptico (1,84mm2 versus 1,78mm2) e para a RNFLT média (0,263±0,06mm versus 0,249±0,07mm), porém esta diferença não foi significativa (p>0,01). Os resultados apresentados diferem de dados publicados nas medidas da CNO em voluntários saudáveis com técnicas diferentes.

Conclusão: As diferenças observadas nas medidas da CNO entre os olhos direitos e esquerdos não apresentam diferenças clinicamente relevantes. O mesmo vale para alterações topográficas etárias ou de acordo com o gênero. Os dados apresentados formam uma nova base para comparação de características do nervo óptico entre olhos saudáveis e olhos com glaucoma.

Resumo
Introdução/Objetivos: O percentil 97,5 para a relação vertical escavação/disco (RVED) foi proposto como uma ferramenta útil como auxílio do diagnóstico de glaucoma em estudos populacionais. Relatos prévios de percentis de RVED ou não foram ajustados quanto ao tamanho do disco óptico ou foram calculados por regressão de populações pequenas baseadas em serviços hospitalares. Nosso objetivo foi gerar percentis de RVED em uma amostra grande baseada na população.

Métodos: Dados foram coletados a partir de 3654 índivíduos de 49 anos ou mais localizados na área de Blue Mountains em Sidney, na Austrália. O diâmtero vertical do disco óptico e RVED foram determinados por meio de planimetria a partir de estereofotografias do disco óptico. A distribuição da RVED e percentis (95, 97,5 e 99) foram calculados.

Resultados: Foram incluídos 6678 olhos na análise. A mediana da relação disco/escavação e os percentis 95, 97,5 e 99 aumentaram de forma linear de acordo com o diâmetro vertical do disco óptico. Um aumento de 0,2 na medianda da RVED (0,35 a 0,55) foi observada em discos pequenos (1,1 a 1,3mm) e discos grandes(1,8 a 2,0mm). Um aumento equivalente de 0,2 (0,59 a 0,74) foi observado no percentil 97,5 de discos pequenos a grandes.

Conclusão: Percentis de RVED para uma população “normal”, ajustado pelo diâmetro vertical do disco óptico foram apresentados. Um quarto de todos os discos foram incluídos nas categorias de discos grandes ou pequenos, o que torna importante a estimativa do tamanho do disco óptico. Estes dados podem auxiliar o diagnóstico de glaucoma na prática clínica assim como fornecer um banco de dados normativo. Os valores de corte dos percentis de RVED ao definir casos de glaucoma em investigações populacionais ainda necessitam futura validação.

Resumo
Objetivos: Quantificar as alterações vasculares retínicas durante e após oxigenação hiperbárica (OH) para tratamentos semanais de 90 minutos 6 X 5.

Métodos: Fotografias do fundus foram realizadas antes, durante e depois da OH a 2,5 ATA nos dias 1, 2, 3, 10, 20, 29 e 30 após o tratamento em 3 pacientes utilizando um oftalmoscópio portátil especial acoplado a uma câmera digital colorida. O diâmetro vascular foi estimado a partir de imagens da retina sem opacidades dos meios. A média de 3 medidas das arteríolas e vênulas próximas ao disco óptico foi calculada. A constância e a repetição do método foram verificadas ao estimar o diâmetro dos vasos por meio de 3 medidas em cada uma das 7 imagens realizadas dentro do intervalo de 70 segundos na mesma pessoa. Análise de variância com correção Bonferroni para comparações múltiplas foi realizada para verificar a existência de diferenças significativas entre os grupos.

Resultados: Ao respirar 100% de oxigênio a 2,5 ATA as arteríolas da retina contraem 9,6+0,3% enquanto as vênulas contraem 20,6+0,3% em relação ao tamanho inicial à pressão ambiente. A vasoconstricção aumenta progressivamente durante o tratamento. Dez minutos após a OH as arteríolas dilatam até 94,5+0,3% e as vênulas dilatam até 89,0+0,3% do seu tamanho primário. Este padrão se mantém para cada dia de medição. A frequência cardíaca diminui constantemente durante a OH. As pressões sistólica, diastólica e arterial média se mantém constantes.

Conclusão: Exposição a oxigênio hiperbárico leva à vasoconstricção na retina. Foi observado que a constricção é constante durante a série de tratamentos. Isto sugere que o oxigênio e seus subprodutos são responsáveis pelas alterações vasulares durante e após a oxigenação hiperbárica provavelmente por meio do auto-regulamento dos vasos da retina.

Resumo
Objetivo: Este estudo tem como objetivo investigar a potencial diferença na reatividade vascular ocular na cabeça do nervo óptico, coróide e retina entre fumantes saudáveis e não fumantes durante a inspiração de carbógenos.

Métodos: 25 voluntários masculinos saudáveis (13 fumantes e 12 não fumantes) participaram deste estudo de coorte observacional duplamente mascarado. Durante inalação de carbógenos (5% CO2 e 95% O2) por 10 minutos foram coletadas medidas do fluxo sanguíneo coroidal e da cabeça do nervo óptico através de medida do fluxo por Doppler Laser (LDF), medidas da amplitude de pulsação do fundus através de interferometria à laser e diâmetro dos vasos da retina através de analisador dos vasos da retina (RVA).

Resultados: Na linha de base o fluxo sanguíneo coroidal foi mais alto (p=0,018, ANOVA) em fumantes do que em não fumantes. Durante administração de carbógeno a resposta no fluxo coroidal foi significativamente diferente entre os dois grupos. Houve um aumento do fluxo em não fumantes após inspiração de carbógenos (p=0,048) comparado ao fluxo relativamente estável em fumantes (p=0,049 entre grupos, ANOVA). Um padrão de resposta similar foi observado pela amplitude de pulsação do fundus, que aumentou de forma marcante após inspiração de carbógeno em não-fumantes porém não em fumantes (p<0,001 entre grupos, ANOVA). Fluxo sanguíneo na cabeça do nervo óptico e diâmetro dos vasos da retina estavam reduzidos nos dois grupos a níveis comparáveis durante a inspiração de carbógeno.

Conclusões: O presente estudo indica reatividade de fluxo sanguíneo coroidal anormal em fumantes. Essas mudanças hemodinâmicas precoces devem estar relacionadas ao maior risco de desenvolvimento de doenças vasculares oculares em fumantes. O mecanismo específico responsável pela reatividade vascular coroidal anormal em fumantes crônicos se mantém desconhecido.

Resumo
Objetivo: Investigar as barreiras, a natureza e graus de viés na participação dos pais de crianças com baixa da acuidade visual em estudos nos serviços de saúde.

Métodos: Pais de crianças com diagnóstico recente de distúrbios oftalmológicos no Grat Ormond Street Hospital, Londres, participaram de um estudo para esclarecer suas experiências e necessidades, relacionadas ao servço de saúde, através de questionário enviado pelo correio seguido por entrevistas. Nós comparamos a participação e não participação de familias em estágios diferentes de recrutamento de acordo com as características sociais, demográficas e clínicas.

Resultados: 20% (55) de todas as famílias elegíveis não puderam ser convidadas a participar devido a dificuldades de comunicação tanto com a família e/ou o médico responsável pela família no hospital e/ou o sistema de arquivos comunitários. Foram recebidos 67% (147/221) dos questionários enviados às famílias contactadas, embora apemas 6% concordaram em participar ativamente do estudo. Comparados aos pais não participantes, aqueles que aceitaram participar tinham maior tendência de ser Ingleses brancos, de grupos sócio econômicos mais altos, de língua Inglesa e sem história de baixa acuidade visual em outro membro da família. Não houve diferenças significantes de acordo com as características clínicas das crianças afetadas.

Conclusões: Famílias de classe social mais baixa e grupos étnicos minoritários tem menor tendência de ser vistos em pesquisas de baixa acuidade visual em crianças nos serviços de saúde que outros grupos sociais. Mobilidade geográfica se mostrou um importante obstáculo na participação de famílias de crianças com deficiência visual em pesquisas do sistema de saúde. Esses achados mostram a importância de se evitar os viéses potenciais no design e interpretação de estudos futuros para assegurar a equidade nas recomendações práticas e políticas de implementação de serviços.
 

Resumo
Objetivo: Ceratocone é descrito como uma ectasia corneal não inflamatória, assimétrica, bilateral. Nosso objetivo é estudar a relação entre a assimetria e a gravidade da doença no Estudo de Coorte Colaborativo Longitudinal da Evolução do Ceratocone (CLEK Study).

Métodos: As análises incluíram 1037 pacientes com cetatocone no primeiro exame do CLEK Study, nenhum deles submetidos à cirurgia corneal prévia em nenhum dos olhos. A assimetria da doença foi determinada através da coleta das diferenças entre os olhos para variáveis contínuas. Para variáveis categóricas, assimetria foi categorizada quando a variável estava presente em nenhum, um ou ambos os olhos. Gravidade da doença foi definida utilizando a técnica da Primeira Lente Definitiva de Afastamento (FDACL) (uma lente de contato rígida para medir a curvatura corneal) no pior olho (olho de maior curvatura). As análises estatísticas incluíram correlação de coeficientes de Pearson (variáveis contínuas) e análises de variância (variáveis categóricas).

Resultados: Geralmente há fraca correlação entre assimetria e gravidade da doença segundo a acuidade visual de baixo contraste (r = 0,12, p = 0,0003), acuidade visual de alto contraste (r = 0,14, p < 0,0001) e acuidade visual de alto contraste com melhor correção (r = 0,29, p < 0,0001). Assimetria de erro refrativo foi moderadamente mais correlacionada com a gravidade da doença (r = 0,41, p < 0,0001), assim como a assimetria nas leituras de menor curvatura (r = 0,61, p < 0,0001) e leituras de maior curvatura (r = 0,54, p < 0,0001). A média da FDACL foi significativamente mais curva em pacientes que tiveram um olho com pelo menos um dos seguntes: estria de Vogt, anel de Fleischer ou cicatriz corneal, comparada com a média da FDACL quando nenhum olho apresentava esses achados.

Conclusão: Pacientes com ceratocone de apresentação mais grave mostram também maior assimetria da doença.

Resumo
Objetivo: Estudos prévios tem sugerido que a fotocoagulação com laser está associada à resolução das drusas em alguns pacientes com DMRI. O objetivo principal deste estudo foi determinar se o tratamento com laser de baixa intensidade aplicado de acordo com o protocolo do “Complications of AMD Prevention Trial (CAPT)” provoca mudanças na circulação da coróide que podem ajudar a explicar o mecanismo causador do desaparecimento das drusas.

Métodos: Este estudo subordinado incluiu 30 pacientes do CAPT com drusas bilaterais tratados e acompanhados na Universidade da Pensilvania. Fluxometria com Doppler Laser foi utilizada para medir a velocidade relativa (Cvel), volume (Cvol) e fluxo do sangue da coróide (Cfl) no centro da fóvea. As medidas foram obtidas através de dilatação pupilar dos dois olhos de cada paciente na visita inicial do CAPT, antes da aplicação do laser em um olho. As medidas foram repetidas em ambos os olhos de cada paciente três meses depois. Examinadores mascarados realizaram as análises das medidas dos exames de Laser Doppler.

Resultados: Comparadas à linha de base, não foram encontradas diferenças significantes na Cvel, Cvol ou Cfl três meses após a aplicação do laser de baixa intensidade, seguindo o protocolo do CAPT, entre os olhos tratados e não tratados. Não foram observadas diferenças significantes nos olhos tratados em comparação aos não tratados. Baseado na variabilidade das medidas de fluxo nos olhos não tratados, nós estimamos um potencial de 85% para detectar uma mudança de 15% no fluxo sanguíneo relativo.

Conclusões: Nossos resultados sugerem que não ocorrem grandes alterações no fluxo sanguíneo da coróide após três meses de tratamento com laser de baixa intensidade, seguindo o protocolo do CAPT.

Resumo
Introdução/Objetivos: Poucos estudos avaliaram as respostas características de normalidade do nistagmo optocinético torsional (NOT). Pesquisamos o efeito de velocidade de estímulo e estímulo central/periférico no NOT.

Métodos: NOT foi produzido por meio de grade sinusoida com rotação de 3o/s a 1000o/s nos sentidos horário e anti-horário. Para pesquisar o efeito de estímulo central, o tamanho do estímulo variou de 2,86o a 50,8o. Um escotoma artificial posicionado sobre o estímulo de 50,8o variou de 2,86o a 43,2o para investigar estímulos periféricos. Oito indivíduos participaram em cada experimento e os movimentos oculares torsionais foram gravados usando video-oculografia. A velocidade de fase lenta média (VFLM) e ganho foram calculados.

Resultados: O ganho máximo ocorreu no estímulo a 8°/s. A VLFM aumentou até a velocidade de estímulo de 200°/s alcançando o máximo de 3°/s em ambas as direções. A VLFM foi correlacionada de forma linear com o logaritmo da velocidade de estímulo. O menor campo, rodando a 40°/s, evocou 10% do ganho obtido pelo maior campo. Quando o estímulo mais periférico foi utilizado, o ganho manteve-se a 50% do ganho evocado quando foi utilizado o campo total.

Conclusão: Um alcance grande de velocidades de estímulo podem produzir NOT e o estímulo periférico contribui significativamente para sua resposta.

Resumo
Objetivo: Caracterizar células imunológicas periorbitais (estágios e cinética) em oftalmopatia associada à tireóide ativa (OAT-A) e inativa (OAT-I).

Métodos: Áreas de tecido adiposo e fibrovascular de crio-secções de tecido orbital de pacientes com OAT-A (n=15), OAT-I (n=11) e controles sadios (n=14) foram avaliados quanto à presença de células MHCII+, leucócitos totais CD45+, células mielóides (monócitos CD33+, macrófagos CD14+(M&phis), RFD7+ Ms maduro, céludas dendríticas RFD1+(DCs) e células linfóides (células T CD4+ & beta e células T; células B CD20+). Os resultados são expostos como medianas com 5% de intervalo de confiança.

Resultados: No septo fibrovascular apareceram CD33+ migratórias claramente correlacionadas com atividade da doença gerada por significante aumento (p<0.05) das porcentagens de CD14+e RDF7+Ms. Supreendentemente, as células CD4+ foram na sua maioria células T, enquanto células T-helper & alpha foram muito menos frequentes. Tratamentos bem sucedidos levaram a OAT-I a, aparentemente, inibir o influxo de monócitos, a diferenciação M e a expressão do receptor da célula T. Tendências similares foram obtidas no tecido adiposo. Interessantemente, RFD1+ DCs estavam completamente ausentes em todas as condições examinadas.

Conclusão: OAT-A apresenta infiltração monocitária periorbital e diferenciação de-novo dos MfOs mas não dos DCs. Nós discutimos um possível papel das células T CD4+ na inflamação em OAT. O tratamento bem sucedido aparentemente inibe o recrutamento monocitário orbital e afeta o enfraquecimento funcional da célula T.

Resumo
Objetivos: Determinar se o fator derivado do epitélio pigmentado (PEDF), uma proteína que inibe angiogênese, é expressada em membranas neovasculares de coróide (MNCs) e em tecidos de um olho com vasculopatia polipoidal da coróide (VPC) em humanos. Além disso, comparamos a expressão do PEDF ao do fator de crescimento vascular endotelial (VEGF), um conhecido estumulador da agiogênese nesses tecidos.

Métodos: MNCs associadas com degeneração macular relacionada à idade (DMRI), estrias angióides e VPC foram obtidas durante cirurgia. A expressão do PEDF e do VEGF nas membranas fibrovasculares subretínicas excisionadas foi determinada através de imunohistoquímica.

Resultados: PEDF e VEGF foram fortemente expressados nas células endoteliais vasculares e células do epitélio pigmentado da retina (EPR) nas MNCs em que numerosos neovasos se mostravam proeminentes (MNCs clinicamente ativas). Por outro lado, imunoreatividade para PEDF e VEGF foi fraca em neovasos com fibrose proeminente (MNCs clinicamente quiescentes). Contudo, as células do EPR foram ainda positivas para PEDF e VEGF. Os specimens de olhos com VPC também mostraram forte expressão de PEDF e VEGF nas células endoteliais vasculares e células do EPR.

Conclusão: Devido ao PEDF ser um inibidor da angiogênese ocular e um inibidor da proliferação celular ocular, nossos resultados sugerem que PEDF em conjunto com o VEGF deve modular a formação de membranas fibrovasculares subfoveais.

Resumo
Objetivos: Determinar o efeito da hipoglicemia em danos isquêmicos da retina.

Métodos: Culturas da retina de ratos foram incubadas em concentrações diversas de glicose enquanto colocadas em condições anóxicas padronizadas. Após isto, o número de neurônios GABA-imunorreativos sobreviventes foi avaliado por meio de imunocitoquímica. Hipoglicemia foi induzida em ratos Wistar pareados por idade e sexo após injeção de insulina de ação rápida. A concentração de glicose no sangue, no vítreo e na retina foram medidos com kit de hexoquinase. Eletroretinografias, PCR-RT semi-quantitativos e histologias foram usadas para comparar a lesão funcional e estrutural da retina nestes ratos com lesões do grupo controle após um período de isquemia retiníca induzida por pressão.

Resultados: Culturas de retina mantidas em baixas concentrações de glicose (<1mM) apresentaram menor número de neurônios GABA imunorreativos sobreviventes após a lesão isquêmica quando comparados com culturas de retina mantidas em concentrações de 5mM. Ratos hipoglicêmicos apresentaram concentrações vítreas de glicose significativamente mais baixas  (0,57 ± 0,04 mM) que os ratos do grupo controle (3,1 ± 0,70 mM; p < 0,001). As amplitudes da onda b e onda a dos ratos hipoglicêmicos após 3 e 7 dias da reperfusão foram significativamente mais baixas do que as amplitudes apresentadas pelos ratos do grupo controle. Além disso, o nível de Thy-1 mRNA (um marcador da célula ganglionar) foi significativamente mais baixo no grupo hipoglicêmico (p<0,001) e houve exacerbação correspondente de lesões estruturais quando comparados ao grupo controle.

Conclusão: A hiploglicemia leva a redução significativa nos níveis de glicose no vítreo e aumenta a lesão isquêmica da retina.

Resumo
Introdução/Objetivos: Hialorunato de sódio (ácido hialurônico) promove a cicatrização do epitélio da córnea in vivo e in vitro em experimentos animais. Hialorunato de sódio é o ligando para CD44, uma molécula de adesão da superfície que foi encontrado em células epiteliais humanas normais da córnea. O objetivo deste estudo foi estudar o efeito do hialorunato de sódio na migração, proliferação e expressão do receptor de CD44 nas células do epitélio corneal humano.

Métodos: Culturas de células do epitélio corneal humano foram realizadas a partir de 32 anéis corneoesclerais e mantidos em 3 condições diferentes de cultura: a) meio simples, b) meio enriquecido com hialorunato de sódio (0,6mg/ml) e c) meio enriquecido com hidroxipropilmetilcelulose (2,5mg/ml). A área total de camadas de células migratórias foi medida por planimetria nos dias 4, 8, 12 e 16. Preparos de citospina das células cultivadas nas diferentes condições foram examinadas imunohistoquimicamente para detecção de proliferação e expressão do receptor CD44 utilizando anti-corpos contra Ki67 e CD44 respectivamente.

Resultados: Células cultivadas na presença de hialorunato de sódio mostraram migração significativamente maior nos dias 12 e 16 (teste de Friedman: p=0,0012 dia 16; p<0,001 dia 12) comparados às células cultivadas nos outros meios. Não houve diferença na proliferação celular (Ki67) ou expressão de CD44 nas células cultivadas sob diferentes condições.

Conclusão: Hialorunato de sódio promove migração mas não proliferação ou expressão de CD44 em células epiteliais humanas cultivadas in vitro. O efeito benéfico do hialorunato de sódio na cicatrização corneal provavelmente está relacionado à migração celular levando à cicatrização rápida. Isto pode ser facilitado pela adesão entre o CD44 e o hialorunato de sódio nas células, que proporciona cobertura da superfície corneal desepitelizada.

Resumo
Objetivo: Avaliar o tratamento utilizando energia pulsada de altos picos emitidos pelo femtosecond laser de pulsos ultracurtos (laser titânio:safira) no comprimento de onda de 800nm para neovascularização corneal utilizando terapia fotodinâmica (PDT) mediada por indocianina verde (ICV).

Métodos: Utilizando gelatina sólida como modelo de córnea in vitro, estudamos a segurança do laser ao determinar se ele provoca degeneração da gelatina com ICV ou sem ICV. Após isso, induzimos neovascularização corneal em coelhos por meio de técnica de sutura intra-corneal. Utilizamos fluoresceinografia para avaliar oclusão antes do PDT e 0, 1, 3, e 10 dias após a PDT. Avaliamos a formação de trombose nas regiões neovasculares por meio de microscopia óptica com corante
de hematoxilina-eosina e microscopia eletrônica de transmissão.

Resultados: A denisdade máxima de potência, segura, do laser variou de 39 a 53W/cm2. A irradiação do laser iniciou 30 segundos após injeção de 10/mg/kg de ICV e todos os segmentos irradiados foram ocluídos nos dias 0, 1, 3 e 10 com 3,8J/cm2. A microscopia óptica e eletrônica documentou a formação de trombose nas regiões com neovascularização.

Conclusão: Laser femtosecond pulsado auxiliado por ICV pode ser utilizado para PDT. Devido à obstrução efetiva da neovascularização corneal em níveis baixos de energia, a energia pulsada de picos algos do laser femtosecond pode ser mais eficiente do que o uso de laser contínuo com PDT.